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植物白頭翁是一種傳統(tǒng)的中藥材，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，性寒，具有清熱解毒的作用。白頭翁皂苷主要包括B4和A3兩種，主要來源于毛茛科植物白頭翁。在藥理應(yīng)用方面，主要有抗菌抗炎，神經(jīng)保護(hù)，增強(qiáng)免疫力等。白頭翁皂苷 A3的化學(xué)式為C41H66O12，分子量為750.956，可溶于甲醇，乙腈，乙醇等溶劑，不溶于石油醚。白頭翁皂苷B4來源于干燥的根，它的化學(xué)式為C59H96O26，分子量為1221.38，可溶于甲醇，乙醇，DMSO等有機(jī)溶劑。

科研方面，檢測白頭翁皂苷含量，一般采用高效液相色譜（HPLC）或液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）等。以HPLC為例，簡單的介紹一下檢測流程。

1.樣品處理

一般采用有機(jī)溶劑提取法，如粉碎過篩后，加入適量的甲醇，超聲處理，讓皂苷充分的溶解出來。然后，冷卻，過濾，得到含有機(jī)溶劑的皂苷。根據(jù)相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)或操作步驟，可以獲得相對詳細(xì)的操作步驟和參數(shù)。在有相關(guān)設(shè)備，溶劑，技術(shù)的前體下，無死角地完成操作。有的時(shí)候，需要對粗提液進(jìn)一步的純化，比如用大孔樹脂等。

2.色譜條件

舉例，采用C18的色譜柱，長250mm，內(nèi)徑4.6um，粒徑5um；柱溫30-40℃。流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸溶液(29:71) ，也有甲醇和水（80:20）的流動(dòng)相，流速為0.8-1.0ml/min，進(jìn)樣量10-20uL。檢測器的話，有用到紫外檢測器，二極管陣列檢測器，質(zhì)譜檢測器等。質(zhì)譜檢測器，是在流動(dòng)相分離提取的基礎(chǔ)上，實(shí)現(xiàn)對化合物的離子碎片化，確認(rèn)化合物的分子量和化學(xué)結(jié)構(gòu)，能夠更準(zhǔn)確的計(jì)算出含量。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

精密稱量白頭翁皂苷B4或A3對照品，加入甲醇，制成0.1mg/mL的溶液。成倍的，梯度稀釋6個(gè)濃度點(diǎn)，確保在檢測器的有效范圍內(nèi)。進(jìn)樣，測定色譜峰，對面積進(jìn)行積分，對應(yīng)各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程。

4.含量計(jì)算

和標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的色譜條件，進(jìn)樣到HPLC，測出色譜峰，根據(jù)保留時(shí)間確定目標(biāo)化合物。對色譜峰面積進(jìn)行積分，結(jié)合回歸方程，可以計(jì)算出樣品中的白頭翁皂苷含量。